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03第1节 样品采集与处理

时间:2017-07-18


第四章 样品分析方法
1、药物样品分析的一般步骤: 采集--处理--检验(鉴别检查含量测定) 2、样品分析方法

? 药品检验工作的基本程序:
?

取样 检验(性状、鉴别、检查、含量测定) 记录与报告

?

?

一、取样(Sample)
1、

科学性、真实性与代表性 ? 2、基本原则:均匀、合理 ? 3、特殊装置:如固体原料药用取样探 子取样 ? 4、取样量 设样品总件数为x
? ? ? ?

当x≤3时,每件取样 X ?1 当x≤300时,按 当x> 300时,按
x 2

随机取样

? 1 随机取样

二、 性状(Description)
检验项目: ? 1、外观、气味和稳定性 ? 2、溶解度 ? 3、物理常数
?

物理常数包括相对密度、熔点、折光率、吸 收系数等;测定结果对药品具有鉴别意义, 也反映药品的纯度,是评价药品质量 的主要指标之一。 构成法定药品质量标准,测定方法收 载于药典附录。
?

二、 性状(Description)
?
? ?

?

?

举例分析:苯甲酸 [性状] 1、本品为白色有丝光的鳞片或针状结晶或 结晶性粉末;质轻;无臭或微臭;在热空 气中微有挥发性;水溶液显酸性反应。 2、本品在乙醇、氯仿或乙醚中易溶,在沸 水中溶解,在水中微溶。 3、熔点 本品的熔点为121~124.5℃。

三、 鉴别(Identifcation)
?

定义:判断已知药物及其制剂的真伪;采用一 组(二个或几个)试验项目全面评价一个药物。

? ? ?

?

例:苯甲酸 [鉴别] 1、取本品约0.2g,加4%氢氧化钠溶液15ml, 振摇,滤过,滤液中加三氯化铁试液2滴, 即生成红褐色沉淀。 2、本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱 一致

四、检查(Detection)
注意事项: ? 1、有效性 ? 2、均一性 ? 3、纯度要求:纯度要求即药物的杂质检 查,亦称限度检查、纯度检查 (Detection of Impurities) ? 4、安全性

五、 含量测定(Assay)
?

准确测定有效成分的含量
判断一个药物的质量是否符合要求,必 须全面考虑鉴别、检查与含量测定三者 的检验结果

?

六、检验报告
?

?
? ? ? ?

注意事项:必须有检验人员、复核人员及 部门负责人签名或盖章,必要时由检验单 位盖章。 (一)原始记录:完整、真实、具体、清 晰 1、供试品情况(名称、批号、规格、数量、 来源、外观、包装等) 2、日期(取样、检验、报告等) 3、检验情况(依据、项目、操作步骤、数 据、计算结果、结论等) 4、若需涂改,只可划线,重写后要签名

涂改方式:划两条细线,在右上角写正确数字,

并签名



9.6543 -8.1270 1.52723



2 0.1031

张三

张三



05 消耗22.31ml
张三

?

5、记录完成后,需复核。复核后的记录, 属内容和计算错误的,由复核人负责;属 检验操作错误的,由检验人负责。

(二)检验报告书 ? 要求:完整、简洁、结论明确。 ? 除无操作步骤外其它内容同原始记录
?

(三)结论
?

1、全面检验均符合质量标准。 2、全面检验后有个别项目不符合规定。 如:本品为“葡萄糖注射液”;检“乙醇溶液 的澄清度”不符合规定,其他各项检验均符合 中国药典的规定,则不得供制备注射剂用。

? ?

(三)结论 ? 3、全面检验后不合药用者,或虽未全面检 验、但主要项目不合规定,已可作不得供 药用处理者。 ? 如:本品为“葡萄糖注射液”,其热原检 查不符合中国药典的规定,不得供药用。
?

?

4、根据送检者要求,仅作个别项目检验者。 如:本品(维生素B12注射液)的pH值为 5.5,检“pH值”符合中国药典的规定,即 pH值 应为4.0~6.0

第一节
?

样品采集与处理

1、科学性、真实性与代表性 ? 2、基本原则:均匀、合理 ? 3、特殊装置:如固体原料药用取样探 子取样 ? 4、取样量 设样品总件数为x
? ? ?

当x≤3时,每件取样 X ?1 当x≤300时,按 当x> 300时,按
5、样品的制备
x 2

随机取样

? 1 随机取样

?

常用采样器

电动采样器

5、样品的制备
?样品制备就是对原始样品的分取、粉碎、混匀、缩分

的过程。

通过制样,使试样能正确代表全体样品
?不同的样品制备方法也不同。

固体经粉碎(磨碎或研碎),过筛 液体、浆体或悬浮体充分摇匀或搅拌均匀

?

常用的制备方法有以下几种:

一、机械混匀 1.四分法 2.分样器法(图) 二、粉碎、过筛 这种方法适用于粮食及水分少的固体食品、饲料。 常用的粉碎装置有粉碎机、旋风磨、咖啡磨、球磨 机等 (图)? 三、研磨? 对含水多的新鲜样品(如马铃薯、水果等)、高 脂肪的样品(如花生),可用缩分、研磨或捣碎的 方法进行混匀与破碎。 四、搅拌?

对液态样品(如油脂)及易溶于水或适当溶剂的 样品,可用溶于溶液搅拌均匀的办法制样。

(三) 样品的保存
?

样品采样后,应用适当的容器储存。

?

在样品运输及保存中,要防止挥发性成分 损失及霉变、变质、成分分解。 一般样品检验结束后应保留样品一个月, 以备复查。 保留样品应存放于适当的容器及地方,尽 可能保持其原状,对易变质的食品不能保 存时,可不保留样品,但应事先对送验单 位说明。

?

?

保存方法:
? ?

?

常温保存法 低温保存法 化学保存法

二、样品处理
试样的前处理过程包括:制成溶液、待测
成分的提取、浓缩(或稀释)、排除干扰、转

态等。
1.直接溶解法 (水,酸碱,有机溶剂) 2.溶剂萃取法 3.有机破坏法

(二)溶剂提取法
溶济提取法是利用物质在某一溶剂(或混 合溶剂)中的溶解特性,将待测成分完全 或部分与样品基质分离的方法。 ? 物质在两相中分配的总量比: ? ? D=C1V1/(C2V2)=Kγ2V1(γ1V2)=KV1/V2? ? (1)提取方法: 1)漂洗法 2)振荡提取法 3)索氏提取法 4)组织捣碎、球磨提取方法 5)萃取法 6)酶解或酸解释放法
?

(2)提取剂及选择溶剂
?

提取法的关键是选择适当的溶剂或溶剂体 系。一般按极性符合相似性溶解原理来选 择溶剂。 因素: 样品的性质、水分含量、脂肪含量、待测 成分性质、分析方法等。 极性 沸点 稳定性 毒性

?

(3)浓缩
?

浓缩过程应注意防止氧化分解,尤其是在浓缩至近 干的情况下,更容易发生氧化。分解,这时往往需 要在氮气流保护下进行浓缩。 常用的浓缩的方法有:?

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1、蒸馏或减压蒸馏方法浓缩? 2.旋转蒸发器浓缩? 3. KD浓缩器浓缩?

4.吹蒸法
5.提取一浓缩联合装置?
?

样品的前处理方法很多,实际运用中,需综合考虑, 灵活运用

三、经有机破坏的分析方法 适用于金属原子与碳原子结合牢
固的有机金属药物,及有机卤素药物。 湿法破坏

干法破坏
氧瓶燃烧法

(一) 湿法破坏
1. 硝酸-高氯酸法
本法适用于血、尿、组织等生物样品
的破坏,有机金属药物经破坏后,得到的 无机金属离子一般呈高价态。

本法不能用于含氮杂环药物的破坏。

2. 硝酸-硫酸法
本法适用于大多数有机物质的破坏,

破坏得到的无机金属离子均为高价态。
本法不能用于含碱土金属有机药物的

破坏。

3. 硫酸-硫酸盐法
本法是往样品中加入浓硫酸作氧化剂,

加入硫酸盐提高硫酸的沸点,增强硫酸的
氧化破坏能力,且防止硫酸的分解损失。 本法常用于含砷或锑有机药物的破坏,

破坏得到的无机金属离子多为低价态。

4. 其它湿法
硝酸—硫酸—高氯酸法 硫酸—氧化剂法(过氧化氢法、高锰

酸钾)
破坏后,金属呈高价态

(二) 干法破坏
适用于湿法不易破坏完全的有 机物以及某些不能用硫酸进行破坏

的有机药物。不适用于含易挥发性
金属(如汞、砷等)有机药物的破 坏

注意事项:
(1)加热或灼烧时,应控制温度在 420℃以下

(2)一定要灰化完全
(3)经本法破坏后,所得灰分往往不 易溶解,但不要轻易弃去

(三) 氧瓶燃烧法
(1)原理
氧瓶燃烧法:将有机药物放入充满氧
气的密闭燃烧瓶中进行燃烧,并将燃烧所 产生的欲测物质吸收于适当的吸收液中,

然后根据欲测物质的性质,采用适宜的分
析方法进行鉴别、检查或含量测定。

C ? Cl ? O 2 ?? ? HCl ? ? ?? ? ?? NaCl
NaOH溶液

点燃

适用于含卤素、硫、氮、硒等
有机药物的分析

本法特点是简便、快速、破坏完 全,尤其适用于微量样品的分析

( 2) 仪器与材料
①仪器装置 燃烧瓶为500、1000或

2000ml无色、磨口、厚壁、
硬质玻璃锥型瓶;瓶塞空 心,底部熔封铂丝一根,

下端呈螺旋状或网状

②称样用材料及称样
A. 固体样品 无灰滤纸 B. 液体样品 纸袋

C. 软膏类样品:将适量样品置不含
被测成分的蜡油纸中包裹严密,外层 再用无灰滤纸包裹

③氧气 ④吸收液
A. 作用:吸收液的作用是将样品经 燃烧分解所产生的各种价态的卤素、

硫、氮、硒等,定量地吸收并转变为
一定的便于测定的价态

B. 吸收液的选择
氟 溴 碘 硒 水

氯 NaOH溶液
H2O2-NaOH

NaOH-硫酸肼饱和溶液
NaOH-硫酸肼饱和溶液 硝酸溶液

硫 NaOH或H2O2

(3)操作方法
①燃烧瓶燃烧前的准备 用洗液洗净后,按各药品项下的规定加 入吸收液,将瓶口用水湿润,小心急速地 通入氧气1min,立即用表面皿覆盖瓶口。 ②样品的准备 取样品适量,精密称定后按规定方法 包裹,固定于铂丝下端的网内或螺旋处。

③样品的燃烧
点燃包有供试品的滤纸尾部,迅速放

入燃烧瓶中,按紧瓶塞,加水少量封闭瓶
口,俟燃烧完毕(应无黑色碎片),充分

振摇,使生成的烟雾完全吸入吸收液中,
放置15min,用水少量冲洗瓶塞及铂丝,

合并洗液及吸收液,同法另做空白试验。
然后按各药品项下规定的方法进行鉴别、

检查或含量测定。

(4)注意事项
①根据被燃烧分解的样品量选用适 宜大小的燃烧瓶。 药典规定的燃烧瓶体积为500、

1000或2000ml三种,采用常量或半
微量分析

待分解样品量
3~5mg(微量分析)

燃烧瓶的体积
150~250ml

20~30mg(半微量分析) 300~500ml 50~60mg 0.6~0.7g或更多 1000ml 2000ml或特殊结 构的燃烧瓶

正确选用燃烧瓶的目的在于:
样品能在足够的氧气中燃烧分解完 全;有利于将燃烧分解产物较快地

吸收到吸收液中;防止爆炸的可能
性。

②测定含氟有机药物时,用石英制 燃烧瓶

③铂丝燃烧时起催化作用
④应同时做空白试验 ⑤燃烧时要注意防爆

⑥燃烧要完全 ⑦燃烧产生的烟雾完全被吸收

(5)应用
例 碘苯酯的含量测定 ChP(2000) 原理 碘苯酯系有机碘化物,用氧瓶燃烧分 解,转变为碘化物,继而氧化为游离的碘, 并被定量地吸收于吸收液中,和氢氧化钠反 应,生成碘化物与碘酸盐,加入溴-醋酸溶 液,使全部转变为碘酸盐,过量的溴以甲酸 及通空气去除。加入碘化钾,使与碘酸盐反 应析出游离碘,用硫代硫酸钠液滴定,碘与 淀粉结合所显的蓝色消失即为终点。

取本品约20mg,精密称定,照氧瓶燃烧法 进行有机破坏,用氢氧化钠试液2ml与水l0ml为 吸收液,待吸收完全后,加溴醋酸溶液(取醋酸钾 10g,加冰醋酸适量使溶解,加溴0.4ml,再加冰 醋酸使成1000m1)l0ml,密塞,振摇,放置数分 钟,加甲酸约lml,用水洗涤瓶口,并通入空气流 约3~5min以除去剩余的溴蒸气,加碘化钾2g, 密塞,摇匀,用硫代硫酸钠滴定液(0.02 Mol/L)滴定,至近终点时,加淀粉指示液,继续 滴定至蓝色消失,并将滴定的结果用空白试验校 正。每lml的硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/L)相当于 1.388mg的C19H29IO2。

滴定度的计算

放大反应

2mol碘苯酯→1molI2
1molI2→1molNaIO+1molNaI

1molNaIO→1/3molNaIO3+2/3molNaI
2 2 molNaIO 1 molNaI+Br2→ 1 3 3 3

即2mol碘苯酯→2molNaIO3

2mol NaIO3+10molI?→6molI2 即2mol碘苯酯→1molI2
→6molI2→12molI→12molNa2S2O3 反应摩尔比为1∶6
cM 0.02 ? 416.34 T? ? ? 1.388mg / ml n 6

98:140. 氧瓶燃烧法中的装置有 A. 磨口硬质玻璃锥形瓶

B. 磨口软质玻璃锥形瓶
C. 铂丝 D. 铁丝

E. 铝丝

96:133(99x:138).选择氧瓶燃烧 法所必备的实验物品

A. 磨口硬质玻璃锥形瓶
B. 铂丝 C. 普通滤纸

D. 氢气 E. 无灰滤纸

99:76.氧瓶燃烧法测定含氯有机药 物时所用的吸收液多数为

A. H2O2溶液 B. H2O2—NaOH溶液
C. NaOH溶液 D.硫酸肼饱和液

E. NaOH—硫酸肼饱和液

99:134. 氧瓶燃烧法可用于
A. 含卤素有机药物的含量测定 B. 醚类药物的含量测定

C. 检查甾体激素类药物中的氟
D. 检查甾体激素类药物中的硒 E. 芳酸类药物的含量测定