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选修3《现代生物科技专题》知识点总结

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选修 3《现代生物科技专题》知识点总结 专题 1 1.基因工程的概念: ⑴基因工程是在 DNA 分子水平 ⑵原理(实质) : 基因重组 。 上进行设计和施工的,又叫做 DNA 重组技术 。 基因工程(DNA 重组技术) ⑶特点:①目的性强(可以 定向 改造某些生物性状) ; ②实现不同物种间的基因重组(打破生殖隔离/克服远缘杂交不亲和障碍) 。 2.基因工程(DNA 重组技术)的工具: 限制酶 、DNA 连接酶 、载体(最常用:质粒)。 基因工程(DNA 重组技术)的工具酶: 限制酶 、DNA 连接酶 。 3. 限制性核酸内切酶(限制酶) ——“分子手术刀”:准确切割 DNA 。 原核生物 特定部位 中分离纯化出来的。 的 某种特定核苷酸序列 。 ,并且使 断 的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 双链 DNA 分子 ⑴来源(分布):主要是从 ⑵功能(作用):能够识别 每一条链中 开,因此具有 黏性末端 4. ⑴作用:将 和 平末端 专一性(特异性) 。 ⑶结果: DNA 分子经限制性核酸内切酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式—— DNA 连接酶 ——“分子缝合针”:将 DNA 片段连接起来。不具有专一性(特异性) 。 双链 DNA 片段 “缝合”起来,恢复被 限制酶 切开的两个核苷酸 之间的 磷酸二酯键 。 ⑵两种 DNA 连接酶(E·coli DNA 连接酶和 T4 DNA 连接酶)的比较: ①相同点:都缝合 的黏性末端 磷酸二酯键 。 大肠杆菌 互补 ②区别:E·coli DNA 连接酶来源于 ,只能 将双链 DNA 片段 .. 之间的磷酸二酯键连接起来; ,能缝合双链 DNA 片段的 T4 DNA 连接酶来源于 T4 噬菌体 ⑶与 DNA 聚合酶作用的异同: DNA 聚合酶是将 单个脱氧核苷酸 酯键 ,催化 两种末端 低 。 ( 互补的黏性末端和平末端 ),但连接平末端的之间的效率较 加到已有的核苷酸片段的末端,形成 需要 模板。 磷酸二 DNA 复制 过程, DNA 连接酶是连接 两个双链 DNA 片段 的末端, 形成 磷酸二酯键 , 不需要 模板。 5.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” :将重组 DNA 分子导入受体细胞 ⑴载体具备的条件: ①有一个至多个 染色体 DNA 进行 限制酶切割位点 同步复制 ,供外源 DNA 片段(基因) 插入 其中。 稳定保存 。 ②进入受体细胞后,在受体细胞中进行 自我复制 ,或整合到染色体 DNA 上,随 ,并能在受体细胞中 ③有特殊的 标记基因 ,供重组 DNA 的 鉴定和选择 。例如:四环素抗性 基因,氨苄青霉素抗性基因…… ⑵最常用的载体是 质粒 ,它是一种裸露的、结构简单的、独立于 细菌拟核之外 , 并具有 自我复制能力 的很小的 双链环状 DNA 分子 。 ; 。 ⑶其它载体: λ 噬菌体的衍生物 、 动植物病毒 6.基因工程的基本操作程序: 目的基因的获取 ; 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 ; 目的基因的检测与鉴定 。 7.基因工程的第一步:目的基因的获取 。 ⑴目的基因是指: 符合人们需要 ⑶目的基因的获取方法:① ② 的, 编码蛋白质 的基因 。 ⑵目的基因可以 从自然界中已有的物种中分离 出来,也可以用 人工的方法合成 。 从基因文库中获取 利用 PCR 技术扩增 目的基因; 目的基因; 目的基因。 ③通过 DNA 合成仪 用化学方法直接人工合成 各个受体菌分别含有这种生物的不同的 部分基因文库:只包含一种生物的 一部分

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